负载连翘苷外泌体/载MSCs/制剂/姜黄素/多柔比星/阿霉素外泌体微球研究制备
2023-03-10 12:18:05 来源:生活
今天瑞禧生命体小编给大家抄录共享的内容是增益连翘生物碱外泌体/馀MSCs/制剂/姜黄以次/多柔比星/阿霉以次外泌体微球的深入研究提纯,一起来看!
提纯增益连翘生物碱( phil)的外泌体( exos)递药系统( phil-exos ) ,并深入深入研究其对人肺上皮腺癌细胞膜A549迁离能力也的影响。改用差速-超颇高速离心依此结合超滤依此借助小鼠肺泡细胞内膜(MHS)比如说的外泌体,成像依此提纯phil-exos 并推算出其粒径及电位,改用透射电子显微镜仔细观察其形态,蛋白质免疫特罗斯季亚涅齐依此鉴定徽标蛋白CD63和 Alix ,激光器一共聚焦显微镜仔细观察A549细胞膜对phil-exos 的所含,划痕实验深入深入研究其对A549细胞膜迁离能力也的影响。
2phil-exos的提纯
改用成像孵卵的方依此提纯 phil-exos。以空白外泌体( 400 ug · mL-',以蛋白量计)和 phil ( 400 ug·mL-')混合冰浴成像,成像条件:20%振幅,3s开/3 s白水, 1 min循环,循环6次,间隔2 min。成像后于37℃室外培养箱中的恢复1 h,然后在4 ℃,120 000 x g离心70 min,去除上清中的游离的 phil,用 PBS浇重悬,即得到phil-exos。
phil-exos 的大约粒径为( 139±1) nm,聚合物颇高度集中倍数(PDI)为(0.237±0.023 ) ,Zeta电位为-(19.33±0.17) mV;外表呈类球状,带有茶托状膜结构;外泌体及 phil-exos对Alix颇高暗示,CD63低暗示。A549细胞膜8h时对 phil-exos 所含良好,且24 h时 phil 的迁离抑制率为46.30% , phil-exos的迁离抑制率为81.99% , phil-exos对 A549细胞膜迁离能力也带有效抑制作用。
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